如何用半自動定氮儀測定蛋白質含量
如何用半自動定氮儀測定蛋白質含量
凱氏定氮法是測定食品中蛋白質含量的經典方法,測定結果穩定,準確。其中半自動定氮儀、蛋白質測定儀都是利用凱氏定氮儀設計的，但是全自動蛋白質測定儀價格昂貴,目前尚難普及。而相應的半自動定氮儀，卻得到了相關人士的認可。因為相較于全自動蛋白質測定儀，它的性價比更高，而且其測定結果與標準法測定無顯著差異。定氮儀作為蛋白質含量測定的首推儀器，具有不可撼動的地位。
用半自動定氮儀測定蛋白質含量，其步驟如下：
1.樣品消解：準確稱取0·5~2·0 g混勻固體樣品或吸取5·0~10·0 ml液體樣品于干凈的消化管內,加0·5 ~1·0 g硒粉或10 g硫酸鉀+1 g硫酸銅, 10ml硫酸,搖勻,加10 ml過氧化氫,混勻,將消化管放入消化器,放上裝好密封圈的排污管,打開抽氣三通進水,使抽氣三通處于吸汽狀態。接通電源,進行消化,如遇難消化的奶粉等樣品,可于消化過程中適當增加過氧化氫的加入量,至消化液呈透明藍綠色液體,關閉電源,冷卻,定容至100 ml。此過程約需1~2 h。2.測定：打開電源,按儀器說明書調試儀器進入待機狀態(約0·5 min)。把裝有50 ml硼酸溶液及2~3滴指示液的三角瓶放到接收托盤上,接收管插入液面,再將內裝適量消化樣品的消化管放到蒸餾器上,加20 ml純水及消化時硫酸5倍量的氫氧化鈉液,打開蒸汽開關進行蒸餾。當流出液至150 ml左右時下移接收瓶,使接收管脫離液面,用純水沖洗接收管,繼續蒸餾0·5 min,結束。取下消化管,關掉蒸汽開關,儀器還原到待機狀態。餾出液用0·0500 mol/L的鹽酸標準溶液滴定至淡紫色為終點,計算蛋白質含量。同時做試劑空白實驗。
與粗蛋白測定儀相比，半自動定氮儀只是較后者少了消化爐，而其測定結果能夠滿足實驗室的需求。因此，半自動定氮儀在很多地方都得到了認可。
